PURIFICATION DE LA DEXTRINASE LIMITE DU SORGHO DE CULTIVAR SAFRARI

Description

Cette thèse a permis d’isoler la dextrinase limite du sorgho Safrari. Cette céréale synthétise cette enzyme lors du maltage. Le plan de Doehlert a optimisé l’extraction à partir de malt vert avec des radicelles à 23 °C dans un tampon d’acétate de sodium 100 mM à pH 5,0 pendant 10 h, ce qui a donné un rapport masse/volume de 5/32. L’activité spécifique de la dextrinase limitante était la plus élevée à une saturation en sulfate d’ammonium de 20 % m/v pendant la purification. La précipitation au sulfate d’ammonium suivie d’une dialyse a donné un extrait de dextrinase limitante partiellement purifié avec un rendement de 75 % et un facteur de purification de 6,5. Le dosage de l’activité de la dextrinase limite au kit Megazyme a été utilisée pour la caractérisation enzymatique et a donné : température optimale d’activité et de stabilité de 50-60 °C ; pH optimal d’activité et de stabilité de 5,0-5,5 ; Ses caractéristiques cinétiques pour l’amidon ont été de 0,03 mg-1mL-1s-1 pour le Vmax et de 2,4 mg/mL pour la constante de Michaelis (Km).